表达含有Factor Xa Protease 识别位点的His-tagged 蛋白
■ 易于构建含有Factor Xa Protease 识别位点的克隆
pQE-30 Xa 载体与pQE-30 相似,但也可编码5’ 端6xHis 标签编码区域所包含的Factor Xa Protease 识别位点和3’ 端的多克隆位点。通过平末端StuI 限制位点进行5’ 端克隆可以直接在Factor Xa Protease 识别位点之后插入目的基因,无任何氨基酸密码子的介入。Factor Xa Protease 切下在蛋白酶识别位点(IEGR)精氨酸残基之后的His 标签多肽,使得重组蛋白在N 端无任何来自载体的氨基酸。消化之后,Factor Xa Protease可被Xa Removal Resin 去除。
应用
Factor Xa System 处理蛋白,需使用pQE-30 Xa 载体,Factor Xa System非常适用于需要去除蛋白His 标签的应用,包括:
■ 蛋白结晶学
■ 使用NMR 进行蛋白结构研究