去除使用TAGZyme pQE 载体表达的蛋白N 端的His 标签,这些蛋白含有非天然的终止位点
■ 高特异性 N 端外切酶活性,避免内部切割
■ 在 37°C,只需 30 分钟即可去除 95% 以上的标签
■ 高纯度的最终产物
■ 采用 Ni-NTA 方法,完全去除污染物
重组的TAGZyme Qcyclase 和pGAPase Enzymes 可与TAGZyme DAPaseEnzyme 相配合,去除由TAGZyme pQE-1 载体表达的含有谷氨酰胺残基的蛋白的His 标签。谷氨酰胺残基在过量Qcyclase 酶作用下变成焦谷氨酸,形成DAPase 终止位点。目的蛋白N 端的焦谷氨酸残基能被pGAPase 酶去除。TAGZyme Qcyclase 和pGAPase 酶在C 端都含有未切割的His 标签,能通过IMAC 从反应液中去除,从而回收得到纯化的、无标签的目的蛋白。
应用
TAGZyme 体系提供特异性切割、重组试剂的使用以及完全去除污染物,是获得不含His 标签蛋白的理想选择,适合的应用包括:
■ 通过 NMR 或 X射线结晶确定蛋白结构
■ 生产具有治疗功能的蛋白